Вирус простого герпеса (1 + 2 тип)
Материал для исследования: соскоб эпителиальных клеток из уретрального и цервикального каналов, с трещин, ранее пораженных мест (с границы пораженной и здоровой ткани), клетки периферической крови.
Метод определения: качественное определение ДНК Herpes simplex virus методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Исследование проводится с использованием ПЦР-тест-системы производства Ампли Сенс (Россия).
Герпетическую инфекцию вызывают две разные, но родственные формы вируса Herpes simplex (простой герпес), известные как вирус герпеса типа 1 (ВПГ-1) — он чаще вызывает «лихорадку» на губах — и вирус герпеса типа 2 (ВПГ-2). Общим свойством перечисленных вирусов является постоянное присутствие в организме человека, с момента инфицирования. Вирус может находиться в «спящем» или активном состоянии и не покидает организм даже под воздействием лекарственных препаратов. Манифестное проявление любой герпетической инфекции свидетельствует о снижении иммунитета.
Вирус простого герпеса (Herpes simplex) первого типа чрезвычайно распространен. Первичное инфицирование происходит, в большинстве случаев, в дошкольном возрасте. В дальнейшем вероятность заражения резко падает. Типичное проявление инфекции — «простуда» на губах. Однако при оральных контактах возможно поражение гениталий. Внутренние органы поражаются только при значительном снижении иммунитета.
Для генитального герпеса характерно появление на половых органах скоплений мелких болезненных пузырьков. Вскоре они лопаются, оставляя мелкие язвочки. У мужчин пузыри образуются чаще всего на половом члене, иногда в мочеиспускательном канале и прямой кишке. У женщин — обычно на половых губах, реже в шейке матки или в анальной области. Через 1–3 недели заболевание как бы проходит. Но вирус проникает в нервные волокна и продолжает существовать, затаившись в крестцовом отделе спинного мозга. У многих больных генитальный герпес дает рецидивы болезни. Они возникают с различной частотой — от одного раза в месяц до одного раза в несколько лет. Их провоцируют другие болезни, неприятности, и даже просто перегревание на солнце.
Вирус генитального герпеса Herpes simplex 2 типа поражает, преимущественно, покровные ткани (эпителий) шейки матки у женщин и полового члена у мужчин, вызывая боль, зуд, появление прозрачных пузырьков (везикул) на месте которых образуются эрозии/язвочки. Однако при оральных контактах возможно поражение покровной ткани губ и ротовой полости.
У беременных: вирус может проникнуть через плаценту в плод и вызвать у него врожденные дефекты. Герпес может вызвать также самопроизвольный аборт или преждевременные роды. Но особенно вероятна опасность заражение плода в процессе родов, при прохождении через шейку матки и влагалище при первичной или рецидивирующей генитальной инфекции у матери. Такое заражение на 50% повышает смертность новорожденных или развитие у них тяжелых повреждений головного мозга или глаз. При этом определенный риск инфицирования плода существует даже в тех случаях, когда у матери ко времени родов отсутствуют какие-либо симптомы генитального герпеса. Ребенок может заразиться и после рождения, если у матери или у отца имеются поражения, во рту, или получить вирус с материнским молоком.
Вирус простого герпеса типа II, по-видимому, связан с раком шейки матки и раком влагалища и повышает восприимчивость к ВИЧ-инфекции, вызывающей СПИД!
ПЦР-диагностика основана на выявлении генетического материала возбудителя (ДНК) в биологическом материале. Достоинствами метода являются:
· возможность использования разнообразного биологического материала в зависимости от места предполагаемой локализации возбудителя;
Выявление генетического материала в малом количестве пробы;
Благодаря высокой чувствительности и специфичности возможность осуществления ранней диагностики заболеваний и выявления бессимптомных форм инфекции;
Показания к назначению анализа:
Подготовка к беременности (рекомендуется обоим партнерам);
Признаки внутриутробной инфекции, фето-плацентарная недостаточность;
Герпес впг 1 и 2 g что это такое
Авидность антител IgG к вирусу простого герпеса I и II типов – общая стабильность связывания антител с антигенами вируса, которая характеризуется низкоавидными антителами IgG в первые недели и месяцы после первичного инфицирования, их постепенным исчезновением из крови и заменой на высокоавидные антитела IgG, что позволяет благодаря определению индекса авидности отличить первичную инфекцию от рецидива.
Данный анализ используется для подтверждения или исключения недавнего первичного инфицирования вирусом простого герпеса I или II типа, дифференциальной диагностики первичного инфицирования герпес-вирусной инфекцией и реактивации хронической или латентной инфекции, оценки риска передачи герпетической инфекции плоду или новорождённому и развития связанным с вирусом осложнений.
Назначается при выявлении положительных и сомнительных результатов определения IgG- и IgM-антител к вирусу простого герпеса, при обследовании беременных с подозрением на первичное инфицирование герпес-вирусом.
Какие тесты входят в данный комплекс:
Авидность, антитела класса G, ВПГ-1, ВПГ-2, герпес-вирус человека, тип 2, герпес-вирус человека, тип 1.
Синонимы английские
Нerpes simplex virus type 1 (HSV-1); Нerpes simplex virus type 2 (HSV-2), HSV avidity antibodies (IgG).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Герпетическая инфекция (ГИ) может формировать тяжелую патологию у детей и взрослых, особенно у иммунодефицитных лиц. Наибольшую опасность это заболевание представляет для беременных женщин, у которых в результате первичной инфекции может произойти самопроизвольный выкидыш либо родиться ребенок с тяжелыми пороками развития. Важной задачей для врача является определение сроков инфицирования беременной. Кроме того, определение формы герпетической инфекции (первичная, рецидивирующая) важно с точки зрения выбора тактики лечения. Серологические тесты, в которых у обследуемых лиц определяют наличие антител к вирусу простого герпеса (ВПГ), позволяют выявлять в крови первично инфицированного ВПГ человека специфические иммуноглобулины класса М (ВПГ- Ig M) через 4-6 дней, иммуноглобулины класса G (ВПГ- Ig G) через 10-14 дней с момента клинических проявлений заболевания. Продукция I g M достигает максимального значения на 15-20-е сутки. IgM сохраняются в организме человека недолго (1-2 месяца), а IgG – всю жизнь на высоком уровне. Это обусловлено тем, что ВПГ относится к возбудителям, которые могут персистировать в организме человека неограниченно долго (пожизненно) в латентной форме. Рецидивирующий герпес обычно протекает на фоне высокой концентрации IgG, что свидетельствует о постоянной антигенной стимуляции организма больного. Однако следует иметь в виду, что далеко не всегда высокие титры коррелируют с активностью инфекционного процесса. Появление IgM у таких больных говорит об обострении болезни. IgM к ВПГ могут образовываться как при первичном инфицировании, так и при реинфекции и при реактивации вируса. Таким образом, выявление специфических IgM не является надежным и достоверным доказательством первичной герпетической инфекции. Кроме того, отсутствие IgM и/или динамики титров специфических IgG могут быть обусловлены поздним сроком взятия крови с момента инфицирования или неадекватным иммунным ответом, связанным с нарушениями иммунной системы.
Данное исследование позволяет определить антитела IgG к 1-му и 2-му типу вируса простого герпеса в сыворотке крови. Антитела IgG к вирусу простого герпеса 1-го или 2-го типа обнаруживают у 80-90 % взрослых людей, поэтому однократное их определение не имеет клинического значения. Важно наблюдать за динамикой изменения их уровня. При острой инфекции или реактивации вируса выявляется нарастание уровня антител IgG. Антитела IgG могут циркулировать пожизненно. 4-кратное нарастание уровня антител при исследовании в парных сыворотках, взятых с интервалом 7-10 суток, свидетельствует о рецидивирующей герпетической инфекции. Определение IgG в сыворотке крови к вирусу простого герпеса 2-го типа показано всем беременным, так как установлено, что инфицированные имеют в 2-3 раза больший риск спонтанного аборта и инфицирования новорождённого по сравнению с интактными пациентами.
При инфицировании вирусом простого герпеса 1-го и/или 2-го типа концентрации антител IgG на ранних стадиях инфекции могут не обнаруживаться. Уровни антител могут быть очень низкими или необнаруживаемыми в периоды между реактивациями. В подобных ситуациях можно получить отрицательный результат даже при наличии предшествующего контакта с вирусом.
Определение авидности IgG – характеристика прочности связи специфических антител с соответствующими антигенами (определяется числом связывающих участков и силой связывания). Высокая авидность специфических IgG-антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование. Определение индекса авидности IgG к вирусу простого герпеса 1-го и 2-го типа позволяет уточнить сроки инфицирования и дифференцировать первичную герпетическую инфекцию от обострения хронической или латентно текущей инфекции.
Вирус простого герпеса 1-го типа. Наиболее частые клинические проявления:
Вирус простого герпеса 2-го типа. Наиболее частые клинические проявления:
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Herpes Simplex Virus 1/2, IgG
Референсные значения: отрицательно.
Положительный результат означает присутствие антител IgG к HSV-1 или HSV-2, что указывает либо на активную, либо на перенесенную в прошлом герпес-вирусную инфекцию.
Отрицательный результат говорит о малой вероятности острой герпес-вирусной инфекции, а также о том, что организм до этого не контактировал с вирусом простого герпеса. Однако непосредственно после инфицирования, когда достаточное количество антител еще не выработалось, результат может оказаться ложноотрицательным. В этом случае рекомендуется дополнительный тест на IgM и повторный анализ на IgG через несколько недель.
Определение авидности IgG к Herpes simplex virus 1/2
Единицы измерения : результаты приводятся в виде индекса авидности (ИА), %.
Индекс авидности менее 50 % – низкоавидные антитела IgG к ВПГ. При первичной инфекции более 50 % антител, персистирующих в организме, обладают низкой авидностью. Если в крови при наличии IgM обнаруживаются IgG с низкой авидностью, то это свидетельствует об острой стадии первичной инфекции. Обнаружение низкоавидных IgG без присутствия IgM может иметь место при сроках инфицирования более 1 месяца. В таких случаях необходимо определять в динамике увеличение титра IgG и изменение индекса авидности.
Индекс авидности 50-60 % – пограничная авидность (серая зона). Пограничный результат указывает на позднюю первичную либо раннюю паст-инфекцию.
Индекс авидности более 60 % – высокоавидные антитела IgG к ВПГ. Наличие высокоавидных IgG при наличии IgM предполагает реактивацию герпетической инфекции либо свидетельствует о вторичном иммунном ответе в случае реинфекции ВПГ. Определение высокоавидных IgG при отсутствии IgM свидетельствует о паст-инфекции. При паст-инфекции (рецидивирующий герпес, первый эпизод непервичного герпеса) индекс авидности IgG составляет 60-100 %.
Только с наработкой высокоавидных ВПГ-IgG и стабилизацией их концентрации можно говорить об окончании острой фазы первичной герпетической инфекции.
Кто назначает исследование?
Дерматолог, инфекционист, гинеколог, уролог, педиатр.
28 Herpes Simplex Virus 1/2, IgM
13 Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК генотипирование [реал-тайм ПЦР]
1. Набор реагентов для иммуноферментного определения индекса авидности иммуноглобулинов класса G к вирусу простого герпеса 1 и 2 типов в сыворотке (плазме) крови. – ВектоВПГ-1,2-IgG-авидность. – Инструкция по применению. – 2014.
Антитела к вирусу простого герпеса 1 и 2 типов lgG, HSV IgG колич.
Описание
Антитела к вирусу простого герпеса 1 и 2 типов lgG, HSV IgG количественный — позволяет определить наличие антител класса G к вирусу простого герпеса 1 и 2 типов, что говорит об инфицированности вирусом простого герпеса 1 или 2 типов.
Анализ на антитела IgG в количественном формате позволяет провести динамическое наблюдение, оценить состояние постъинфекционного иммунитета к вирусу простого герпеса.
Вирус простого герпеса (ВПГ, HSV), или герпес, бывает двух видов: вирус простого герпеса первого типа (ВПГ-1) и вирус простого герпеса второго типа (ВПГ-2). Обе формы вируса — высококонтагиозны. Основной путь передачи герпеса: воздушно-капельный, контактный, половой, внутриутробный, гемотрансфузионный, при пересадке органов.
ВПГ-1 (Herpes Simplex virus I) — передаётся через оральный контакт и зачастую вызывает «простуду» на губах (оролабиальный герпес).
К типичным симптомам ВПГ-1 относят:
ВПГ-2 (генитальный герпес) — относится к числу инфекций, передаваемых половым путем, которые могут вызвать генитальный герпес. Общим свойством перечисленных вирусов является постоянное присутствие в организме человека, с момента инфицирования. Вирус может находиться в «спящем» или активном состоянии и не покидает организм даже под воздействием лекарственных препаратов.
Манифестное проявление любой герпетической инфекции свидетельствует о снижении иммунитета. Вирус генитального герпеса Herpes simplex 2 типа поражает, преимущественно, покровные ткани (эпителий) шейки матки у женщин и полового члена у мужчин, вызывая боль, зуд, появление прозрачных пузырьков (везикул) на месте которых образуются эрозии/язвочки. Однако при оральных контактах возможно поражение покровной ткани губ и ротовой полости. Через 1–3 недели заболевание как бы проходит. Но вирус проникает в нервные волокна и продолжает существовать, затаившись в крестцовом отделе спинного мозга. У многих больных генитальный герпес даёт рецидивы болезни. Они возникают с различной частотой — от одного раза в месяц до одного раза в несколько лет. Их провоцируют другие болезни, неприятности, и даже просто перегревание на солнце.
У беременных вирус может проникнуть через плаценту в плод и вызвать у него врождённые дефекты. Герпес может вызвать также самопроизвольный аборт или преждевременные роды. Но особенно вероятна опасность заражения плода в процессе родов, при прохождении через шейку матки и влагалище при первичной или рецидивирующей генитальной инфекции у матери. Такое заражение на 50% повышает смертность новорожденных или развитие у них тяжёлых повреждений головного мозга или глаз. При этом определённый риск инфицирования плода существует даже в тех случаях, когда у матери ко времени родов отсутствуют какие-либо симптомы генитального герпеса. Ребёнок может заразиться и после рождения, если у матери или у отца имеются поражения, во рту, или получить вирус с материнским молоком. ВПГ-2 связан с раком шейки матки и раком влагалища и повышает восприимчивость к ВИЧ-инфекции, вызывающей СПИД!
Антитела при HSV
Антитела класса IgG начинают вырабатываться через 10–14 дней с момента инфицирования и остаются в крови на всю жизнь, что обеспечивает иммунитет человека от повторного заражения.
Антитела класса G вырабатываются в период хронической инфекции вирусом простого герпеса первого или второго типа. Диагностическое значение при первичной инфекции вирусом герпеса имеет выявление четырёхкратное увеличение титров специфических иммуноглобулинов IgG в парных сыворотках крови, полученных от больного с интервалом в 10–12 дней. Рецидивирующий герпес обычно протекает на фоне высоких показателей IgG, свидетельствующих о постоянной антигенной стимуляции организма.
HSV и TORCH
HSV-инфекция входит в группу TORCH-инфекций (название образовано начальными буквами в латинских наименованиях — Toxoplasma, Rubella, Cytomegalovirus, Herpes), считающихся потенциально опасными для развития ребенка. В идеальном случае проконсультироваться с врачом и пройти лабораторное обследование на TORCH-инфекции женщине нужно за 2–3 месяца до планируемой беременности, поскольку в этом случае будет возможность предпринять соответствующие лечебные или профилактические меры, а также при необходимости в будущем сравнить полученные результаты исследований до беременности с результатами обследований во время беременности.
Интерпретация результатов
Единицы измерения: УЕ*
ВПГ «предскажет» снижение иммунитета, и что еще нужно знать о носительстве вируса герпеса
Близкие, но не равные
На сегодняшний день медицина выделяет всего 7 значимых для человека типов герпеса. А в этой статье речь пойдет о двух первых: простом герпесе 1 и 2 (ВПГ 1 и 2).
Оба типа структурно очень похожи между собой, оба (1, 2 или их сочетание) – выявляются почти у 90% взрослого населения, оба пожизненно остаются в нервных ганглиях, но отличаются «предпочтениями» по поражаемым органам и вероятными последствиями своего присутствия.
Так, первый (или лабиальный) тип герпеса известен многим «под именем простуды» на губах. И в большинстве случаев «базируется» именно в этой области. Но приблизительно в 20% случаев все же «мигрирует» на область половых органов, сопровождаясь признаками генитального герпеса.
В тяжелых случаях, ВПГ-1 может вызывать стоматит, конъюнктивит, пневмонию, поражение ткани (энцефалит) и оболочек (менингит) головного мозга, а также различные нейропатии.
При этом, инфицирование чаще происходит еще в детстве, «профилактируя» тем самым заражение ВПГ-2. Однако, в то же время, антитела к ВПГ-1 способны «поддерживать» бессимптомное течение инфекции, вызванной ВПГ-2.
Второй (или генитальный) тип герпеса занимает второе место «в рейтинге» инфекций, передающихся половым путем. И способен поражать кожу и слизистые наружных и внутренних половых органов.
Кроме того, персистенция ВПГ-2 у женщин связана с хроническим сальпингоофаритом (воспаление яичников и маточных труб), бесплодием и невынашиванием. А активная инфекция во время родов чревата тяжелыми осложнениями для плода.
Когда иммунитет ограничен
Отличительной чертой 1 и 2 представителей семейства герпес-вирусов является их способность эффективно ускользать от «надзора» ослабленных иммунных механизмов.
Однако, при нормальном иммунитете, антитела к ВПГ вырабатываются «по той же схеме», что и к любой другой инфекции.
Так, IgM и IgA) обнаруживаются в крови спустя 2-3 недели от начала клинических признаков, являются маркером острой «свежей» или обострения уже имеющейся инфекции, с сохранением антител максимум до 1 года.
А IgG появляются не ранее, чем через 3-4 недели и сохраняются в крови годами. Правда 100% защиты от герпеса все равно не дают и их уровень сильно зависит от индивидуальных особенностей иммунитета.
Нарушения иммунных механизмов, связаные с герпесом:
Причем у людей, регулярно страдающих от признаков ВПГ, нарушения иммунитета, как правило, имеют место еще с детства. А найти «поломанное» звено и составить схему терапии может помочь анализ крови на иммунный статус (10.0.D10.204).
Вирус простого герпеса I и II типа IgG
Описание исследования
Цель данного теста – определение наличия антител IgG к вирусу простого герпеса (ВПГ) 1 и 2 типа.
ВПГ – один из представителей семейства ДНК-содержащих вирусов герпеса, состоящего также из цитомегаловируса, вирусов ветряной оспы, Эпштейна-Барр (вирус 4-го типа), вирусов типов 6, 7, 8.
Существует 1 и 2 типы ВПГ. Инфекционное заболевание, ими вызываемое, называется герпесом. Их структура во многом сходна, однако каждый из типов имеет присущие только ему признаки. Областью поражения герпеса 1 типа является, как правило, верхняя часть туловища (характерные высыпания наблюдаются на слизистых оболочках ротовой полости, кожно-слизистых участках лица, глаз). Мишенью ВПГ-2 являются гениталии, анальная область, бедра и ягодицы. Типы герпеса передаются разными путями: если заражение первым происходит через слюну, то вторым – при интимной близости. При этом не исключена возможность «вторжения» любого из типов вируса в соседние области: каждый тип способен проявиться на любой половине тела.
Инфекция, вызываемая вирусом, получила широкое распространение. По разным данным герпесом поражено от 65 до 90% людей (преимущественно 1 тип ВПГ). Исчезновение явных признаков герпеса не говорит о том, что инфекция покинула организм – от нее избавиться практически невозможно. Пребывая в «спящем режиме», вирус прячется в нервных тканях. Периодически у него наступают периоды бодрствования, которые вызывают повторное проявление инфекции. Первичное инфицирование имеет более яркое проявление, чем рецидив инфекции. В любом случае по степени активности вируса можно сделать вывод о состоянии иммунной системы – эти два показателя взаимообратны (т.е. при слабой иммунной реакции вирус более очевидно проявляет свое присутствие и наоборот). Еще одним из факторов, различающих 1 и 2 тип ВПГ является возраст инфицированного. 1 тип поражает, как правило, детей, а 2-й тип характерен для подросткового возраста и взрослых людей.
Поскольку ВПГ-1 и ВПГ-2 во многом сходны, иммунный ответ на появление герпеса 1 типа в два раза уменьшает опасность заражения ВПГ 2 типа, а также делает его проявления менее болезненными (это особенно актуально при инфицировании генитальным герпесом).
Особенную опасность представляет герпес половых органов при беременности, т.к. риск заразить ребенка весьма велик. Первичное поражение гениталий и повторные проявления инфекции в подавляющем большинстве возникают при участии вируса 2-го типа (75 и 98% соответственно), и лишь малая часть приходится на ВПГ-1. Приведенные цифры могут отличаться в разных регионах и популяциях.
Самой тяжелой формой герпеса, представляющей чрезвычайную опасность для ребенка, является герпес новорожденных. Как правило, его вызывает вирус 2 типа, а заражение происходит во время процесса родов. Внутриутробное заражение встречается крайне нечасто. Особенно заразной является первичная инфекция гениталий, полученная в канун родов, т.к. острая фаза инфекции характеризуется присутствием вируса в слизистых оболочках родовых путей при отсутствии в организме нужного количества антител. Инфицирование плода может произойти при выходе инфекции в организме матери из латентного («спящего») состояния, а также после рождения в процессе бытовых контактов. Уменьшить вероятность инфицирования ребенка можно только своевременной диагностикой инфекции и проведением соответственной профилактики. В настоящее время практикуется ряд тестов, позволяющих определить наличие герпеса. Прямым методом является определение ДНК вируса в пробе, взятой на месте высыпаний. Если очевидных проявлений на момент обследования нет или они не явны, а также при сомнительных показателях исследования ДНК, применяются методы, позволяющие определить наличие в организме антител к вирусу. Подтверждение факта иммунного ответа на инфекцию не дает развернутой информации о ее форме (острая/хроническая) и месте нахождения. Однако серологические тесты (по исследованию наличия антител) полезны, когда другими методами обследование провести невозможно, а определить присутствие или отсутствие заражения необходимо.
Кроме названых, существуют методы раздельного исследования разных классов антител к разным типам герпеса. Такое типирование иммуноглобулинов (антител) позволяет определить инфекцию и (или) состояние иммунитета:
В случае расхождения показателей по статусу инфекции и степени вероятности ее передачи, таким парам оказывается дальнейшая консультационная помощь.
Возможность типировать иммуноглобулины существует благодаря тому, что оболочечные гликопротеины G вируса ПГ 1 и 2 типа имеют различия, как, соответственно, и антитела к ним. Их исследование – это единственный вариант определения, какой именно тип вируса поразил организм. Другие тесты, исследующие наличие антител к вирусу герпеса, носят более общий характер, определяя в принципе иммунную реакцию организма на большее число антигенов данного вируса.
Исследования показали, что существует форма вируса с дефицитом гликопротеина G. И хотя вероятность такой формы невелика (порядка 5-10%), но в дополнение к типоспецифическим тестам при необходимости рекомендуется проведение исследования наличия антител без их типирования. Для оценки состояния иммунной системы беременных или будущих родителей рекомендуется проведение первичного обследования на присутствие антител. Если результат данного теста положительный и антитела IgG обнаружены, то лишь тогда есть необходимость отдельно определять, какой из типов (1/2) вируса инициировал их продукцию.
Подготовка к исследованию
Кровь для анализа рекомендуется отбирать не раньше, чем через 4 часа после еды.
Показания к исследованию
Интерпретация исследования
Результат обследования описывается индексом позитивности – условной единицей, вычисляемой по формуле:
ИП = оптическая плотность в конкретной пробе/предельная оптическая плотность.
Посредством данной величины описывается факт присутствия или отсутствия антител, индекс позитивности не дает количественной характеристики концентрации антител.
Результаты интерпретируются следующим образом:
Важно! При любых результатах вывод об инфицировании только по показателям теста не делается. Диагностика осуществляется еще и по совокупности дополнительных факторов – наличию признаков заражения вирусом герпеса и присутствию/отсутствию в прошлом проявлений инфекции или факта инфицирования.
Отрицательный ответ может быть:
Положительный результат свидетельствует:
Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:
Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович Пол: м Год рождения: 01.01.0000
Дата исследования: 12.12.0000